Genetic molecular analysis of Coffea arabica (Rubiaceae) hybrids using SRAP markers
Manoj Kumar Mishra, Narayana Suresh, Asha M. Bhat, Nayani Suryaprakash, Saya Satheesh Kumar, Anil Kumar & Jayarama
ABSTRACT
In Coffea arabica (arabica coffee), the phenotypic as well as genetic variability has been found low because of the narrow genetic basis and self fertile nature of the species. Because of high similarity in phenotypic appearance among the majority of arabica collections, selection of parental lines for inter-varietals hybridization and identification of resultant hybrids at an early stage of plant growth is difficult. DNA markers are known to be reliable in identifying closely related cultivars and hybrids. Sequence Related Amplified Polymorphism (SRAP) is a new molecular marker technology developed based on PCR. In this paper, sixty arabica-hybrid progenies belonging to six crosses were analyzed using 31 highly polymorphic SRAP markers. The analysis revealed seven types of SRAP marker profiles which are useful in discriminating the parents and hybrids. The number of bands amplified per primer pair ranges from 6.13 to 8.58 with average number of seven bands. Among six hybrid combinations, percentage of bands shared between hybrids and their parents ranged from 66.29% to 85.71% with polymorphic bands varied from 27.64% to 60.0%. Percentage of hybrid specific fragments obtained in various hybrid combinations ranged from 0.71% to 10.86% and ascribed to the consequence of meiotic recombination. Based on the similarity index calculation, it was observed that F1 hybrids share maximum number of bands with the female parent compared to male parent. The results obtained in the present study revealed the effectiveness of SRAP technique in cultivar identification and hybrid analysis in this coffee species.
RESUMEN
En Coffea arabica (café arabica), el fenotipo y la variabilidad genética son bajos debido a la estrecha base genética y la autofecundación de la especie. Por su alta similitud fenotípica entre la mayoría de las colecciones de arábica, la selección de líneas parentales para hibridación entre variedades, y la identificación de los híbridos resultantes en una fase inicial de crecimiento, es difícil. Para la identificación de variedades estrechamente relacionadas y sus híbridos, los marcadores de ADN son confiables, pero los polimorfismos de amplificación de secuencias relacionadas (SRAP, por sus siglas en inglés) constituyen una nueva tecnología de marcadores moleculares basada en PCR. En este trabajo, sesenta progenies arábica híbridas, pertenecientes a seis cruces, fueron analizadas utilizando 31 marcadores altamente polimórficos. El análisis reveló siete tipos de perfiles de marcadores que son útiles en la discriminación de los progenitores y los híbridos. El número de bandas amplificadas por pares de cebadores estuvo entre 6.13 a 8.58 con un promedio de siete bandas. Entre las seis combinaciones de híbridos, el porcentaje de bandas compartidas entre híbridos y sus progenitores estuvo entre 66.29% y 85.71% con bandas polimórficas que variaron entre 27.64% y 60.0%. El porcentaje de fragmentos híbridos específicos obtenidos en diversas combinaciones híbridas varió entre 0.71% y 10.86% lo que se atribuye a la recombinación meiótica. Con base en el cálculo del índice de similitud, se observó que los híbridos F1 compartieron un número máximo de bandas con el progenitor femenino que con el masculino. Los resultados obtenidos en este estudio muestran la eficacia de la técnica de SRAP en la identificación de cultivos e híbridos de esta especie de café.