Isolation and characterization of infectious Vibrio sinaloensis strains from the Pacific shrimp
Litopenaeus vannamei (Decapoda: Penaeidae)
Ma. del Carmen Flores-Miranda, Antonio Luna-González, Ángel I. Campa Córdova, Jesús A.
Fierro-Coronado, Blanca O. Partida-Arangure, José Pintado & Héctor A. González-Ocampo
ABSTRACT
Infectious diseases especially those caused by bacterial and viral pathogens are serious loss factors in shrimp farming. In this study, bacteria were isolated from the gut and hepatopancreas of stressed shrimps obtained from a commercial farm. The isolates were screened on Thiosulfate citrate bile salt sucrose (TCBS) agar plates for the selection of Vibrio species. Presumptive vibrios were characterized through tests for hemolytic and enzymatic activity, hydrophobicity, growth and molecular identification. Three experimental infections were conducted in order to confirm the pathogenicity of selected bacterial strains VHPC18, VHPC23, VHPC24 and VIC30. In the third experimental challenge the LD50 was obtained, it lasted 10 days with 10 shrimp, weighing 6.9±1.1g, per tank. The treatments in triplicate were: (1) saline solution (control group); (2) 2×105CFU/shrimp; (3) 4×105CFU/shrimp; (4) 2×106CFU/shrimp; (5) 4×106CFU/shrimp, and (6) 8×106CFU/shrimp. In all challenges, water parameters measured during the experimental period remained within optimum ranges. Pathogenicity tests confirmed that the mixture of four vibrio isolates, identified as Vibrio sinaloensis, was virulent for L. vannamei. The LD50 value was 1.178×105CFU/g body weight. V. sinaloensis may act as opportunistic pathogens for cultured L. vannamei.
RESUMEN
Las enfermedades de etiología infecciosa, especialmente las causadas por patógenos bacterianos y virales ocasionan graves pérdidas en el cultivo de camarón blanco Litopenaeus vannamei. En este estudio se caracterizó: la actividad enzimática y hemolítica; hidrofobicidad; crecimiento e identificación molecular de vibrios aislados del intestino y hepatopancreas de camarones estresados, obtenidos de una granja comercial, en medio Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa. Además, se realizaron tres infecciones experimentales para confirmar la patogenicidad de las cepas bacterianas seleccionadas VHPC18, VHPC23, VHPC24 y VIC30. En la tercera infección experimental se obtuvo la LD50, el reto duró 10 días, con 10 camarones por tanque con un peso de 6.9±1.1g. Los tratamientos se realizaron por triplicado: (1) solución salina (grupo control); (2) 2×105UFC/camarón; (3) 4×105UFC/camarón; (4) 2×106UFC/camarón; (5) 4×106UFC/camarón y (6) 8×106UFC/camarón. En todos los retos, los parámetros del agua permanecieron dentro de los intervalos óptimos. Las pruebas de patogenicidad confirmaron que la mezcla de cuatro aislados de Vibrio, identificados como Vibrio sinaloensis, fue virulenta para L. vannamei. El valor de la LD50 fue de 1.178×105UFC/g de peso corporal. Los resultados permiten establecer que las cepas de V. sinaloensis pueden actuar como patógenos oportunistas en L. vannamei cultivado.